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          蛋白組學
          Label free蛋白質譜

          產品詳情
          在線詢價

          技術簡介

          蛋白質組相對定量分析

          蛋白質非標記定量技術(label-free)通過液質聯用技術對蛋白質酶解肽段進行質譜分析,無需使用昂貴的穩定同位素標簽做內部標準,它克服了傳統的同位素標記的缺點,即過高的樣品濃度, 復雜的實驗方案及價格過高的原料等,該方法具有速度更快,更簡潔及更簡明的結果等優點。蛋白質非標記定量技術(label-free)只需分析大規模鑒定蛋白質時所產生的質譜數據,比較不同樣品中相應肽段的信號強度,從而對肽段對應的蛋白質進行相對定量。 

          實驗流程

          實驗流程

          云序優勢

          檢測通量高:

          一次性的對樣品中的全部蛋白進行相對定量分析。

          結果準確:

          利用高分辨率的質譜法檢測,相對二維電泳等傳統方法而言更加準確,快捷。

          無需標記:

          克服標記樣本的局限性,可研究大規模樣本。

          樣品需求量少:

          每run可檢測多達20種蛋白。

          性價比高:

          無需使用昂貴的標記實際,實驗性價比高。

          樣本要求

          樣本要求

          1)富含雜質或蛋白含量低的樣本,如植物的根莖、木質部、韌皮部組織等:干重≥5g

          2)植物類樣本送樣量同樣適合于蕈類真 菌,如蘑菇、木耳:濕重≥1g。

          3)細胞樣本如需進行磷酸化位點富集鑒定,細胞數目須達到:107,約細胞沉淀體積100μl。

          4)由于解凍后血細胞易破裂,細胞內蛋白溶出來會影響分析結果,因此建議不要直接送全血樣本。

          5)血液類樣本:如果直接送提取蛋白,需先去除高豐度蛋白。

          6)尿液樣本:送樣前1000rpm離心5min,棄去沉淀。

          7)如果是其他特殊樣本,或對樣本要求有疑問,請聯系我們。

          數據分析

          數據產出統計

          蛋白質鑒定結果

          蛋白質定量結果

          蛋白質GO分析

          蛋白質COG分析

          蛋白質Pathway代謝通路分析

          差異蛋白GO富集分析

          差異蛋白的Pathway富集分析

          重復性分析(僅針對有重復設計的項目)

          多樣品間表達模式聚類(適用于樣本數≥3的項目)

          案例解析

          案例1:研究小鼠體外胚胎移植引起長期效應的潛在原因

          研究內容:

          以體內受精(IVO)與體外受精(IVP)發育形成的胚胎為對象,比較其蛋白質組差異,集中研究體外受精對后代產生長期效應的潛在原因,為研究輔助生殖技術(ART)產生的后代發生多重畸變的分子起源和潛在機制提供參考。

          研究路線:

          樣本:分別取IVO 7.5,IVO10.5,IPV 7.5,IPV10.5時的小鼠胚胎。

          技術:label-free質譜,3次技術重復。

          研究結果:

          IVO7.5/IPV7.5組、 IVO10.5/IPV10.5組的差異蛋白分別為300和262個。 差異蛋白與轉錄后、翻譯和翻譯后調控功能相關,并且在mRNA和蛋白層面表達相關性較好。部分差異蛋白參與能量和氨基酸代謝以及神經核感官發育的過程,可以作為研究ART誘導子宮發育遲緩和神經發育異常機制的候選靶標。差異蛋白在神經退行性疾病通路上明顯富集,提示通過ART產生的后代對其易感性可能會增加。




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